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Anti-Ki-67抗體免疫組化抗體作用機制與檢測原理分享

更新時間:2025-09-01      點擊次數:13
   Anti-Ki-67抗體免疫組化抗體是一種廣泛應用于免疫組織化學(IHC)檢測的關鍵生物試劑,用于標記細胞核內的Ki-67蛋白,是評估細胞增殖活性的重要工具。Ki-67抗原由MKI67基因編碼,僅在處于細胞周期活躍期(G1、S、G2和M期)的細胞中表達,在靜止期(G0期)則不表達,因此其陽性率可準確反映組織中增殖細胞的比例,在腫瘤病理診斷、預后評估和科研分析中具有重要價值。
  作用機制與檢測原理
  在免疫組化實驗中,Anti-Ki-67抗體免疫組化抗體通過特異性識別并結合組織切片中細胞核內的Ki-67蛋白。經過抗原修復、一抗孵育、二抗結合及顯色反應(如DAB顯色)等步驟,陽性細胞核呈現棕褐色,可在顯微鏡下清晰觀察。通過計算陽性細胞占總腫瘤細胞的百分比(即Ki-67指數或增殖指數),可量化腫瘤的增殖能力。
 

 

  臨床應用價值
  腫瘤診斷與分型:Ki-67指數有助于區分良惡性病變,如在乳腺癌中,高Ki-67表達常提示腫瘤侵襲性強。
  預后評估:高Ki-67指數通常與腫瘤生長迅速、復發風險高、生存期短相關,是多種癌癥(如淋巴瘤、神經內分泌腫瘤、膠質瘤)的重要預后指標。
  治療指導:在乳腺癌治療中,Ki-67水平可輔助判斷是否需要化療或內分泌治療,尤其在Luminal型乳腺癌的分型中具有指導意義。
  抗體類型與選擇
  目前常用的Anti-Ki-67克隆號包括MIB-1(廣泛使用)、Ki-67、278等,其中MIB-1克隆因穩定性高、特異性強而被廣泛認可。抗體可分為即用型和濃縮型,適用于不同自動化染色平臺(如Leica、Dako、Roche)。選擇時需注意抗體的種屬來源(多為小鼠單克隆)、適用樣本類型(石蠟切片或冰凍切片)及驗證數據。
  檢測注意事項
  抗原修復:需進行熱誘導抗原修復(HIER),通常使用EDTA或檸檬酸緩沖液。
  陽性對照:建議使用增殖活躍的組織(如扁桃體、淋巴結)作為對照。
  判讀標準:應避免壞死區和邊緣區域,隨機選取多個高倍視野(如400×)計數至少500–1000個腫瘤細胞,報告陽性百分比。

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